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液相色譜柱梯度優(yōu)化的技巧有哪些?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2021-07-07
液相色譜儀梯度優(yōu)化的技巧有哪些?有許多種優(yōu)化操作,主要取決于您的目的和分析方法的科學(xué)性。還是分析時間?從測試的成本中?還是準(zhǔn)確?由于目的不同,許多方法需要改變。

  在液相色譜分析過程中,我們經(jīng)常遇到的問題主要有二種,一種與液相色譜儀器本身因素有關(guān),如液相色譜的閥門、混合器、檢測器的光源以及其它的一些硬件設(shè)備。出現(xiàn)這類問題后,如果能找出問題根源,解決起來一般很簡單,而且這類問題可以通過對儀器的精心維護(hù)來避免;而另一類問題則是分析方法本身造成的問題,如出現(xiàn)色譜峰形狀不好、峰與峰之間不能分開、基線飄移等等。不幸的是,如果出現(xiàn)這類問題,看起來似乎很明顯,但是要找出原因并解決這類問題卻非常困難。

色譜柱

  為了減少出現(xiàn)這一類型的問題,就必須在分析之前,仔細(xì)研究并選擇一個好的分析方法,有了一個好的分析方法,就很容易獲得理想的分離效果,而且在出現(xiàn)問題是也很便于找出原因。要選擇一個好的分析方法,就必須對液相色譜分析的一些基本原則要有一個很深的了解。下面是我們實(shí)驗(yàn)室對色譜分析人員進(jìn)行技能培訓(xùn)的一些基本知識。

  一:分析方法選擇的基本原則

  假如你想做一頓豐盛的晚餐,首先必須看一下食譜,然后檢查一下你所需的東西是否齊全,如果少了配料還必須去商店購買,這樣你才可能做出一頓可口的晚餐。同樣進(jìn)行液相色譜分析時,也必須按照一定的程序進(jìn)行,首先你必須要有專門的儀器和試劑,然后有目的地選擇分析方法,這樣你才可能得到好的分析結(jié)果,避免走一些彎路。

  二:柱子的選擇

  在液相色譜分析方法中最重要的就是色譜柱的選擇,色譜分析人員面對幾百種色譜柱,你從何入手呢?采取的方法就是訂閱LCGC亞太版中Ron Majors的“色譜柱觀察”這一專欄,自1984年第一期以來,Ron Majors在這一專欄中介紹許多新柱子、色譜柱新技術(shù)、色譜柱使用方法等方面的信息。

  現(xiàn)在大部分液相色譜分析都是使用反相色譜柱,其中以C18和C8柱最為流行。

  然而色譜分析并不是流行歌曲,這兩種色譜柱之所以運(yùn)用廣泛是因?yàn)樵诖蠖鄶?shù)情況下,使用這兩種柱子都能獲得理想的分離效果。盡管一些樣品的分離并不是這兩種柱子,但C18和C8經(jīng)常是最好的固定相,C18和C8柱兩者之間并無明顯的差別,但在我們實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常使用的是C8柱。

  在過去的15年中,高純度、低金屬雜質(zhì)含量的硅膠基質(zhì)色譜柱是最為實(shí)用的色譜柱之一。但傳統(tǒng)色譜分析用的硅膠顆粒具有差異性及酸性表面,固定在柱子表面后,導(dǎo)致出現(xiàn)拖尾峰,而且柱與柱之間的重現(xiàn)性較差。最近硅膠基質(zhì)中出現(xiàn)一種新的產(chǎn)品,這種硅膠具有Metal-free特性,因此柱子性能更穩(wěn)定,重現(xiàn)性也更好,分離后峰的形狀也很不錯。

  這種改性后的硅膠稱為B型硅膠。由于具有上述優(yōu)點(diǎn),大多數(shù)色譜制造商都用不同的名稱來表明它們與傳統(tǒng)的產(chǎn)品之間的不同,如Intertsil(日本)、BDS(USA)、YMC--Base(USA)等等。大多數(shù)色譜柱制造商都生產(chǎn)以B型硅膠為基質(zhì)的色譜柱,因此你可以選擇你所喜歡的供應(yīng)商提供的產(chǎn)品。由于這種產(chǎn)品具有上述特性,建議使用A型硅膠柱的改為使用B硅膠柱。

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