流動(dòng)相跑空，會(huì)對(duì)柱子有影響嗎?
在實(shí)驗(yàn)室操作中，流動(dòng)相跑空是一個(gè)需要特別關(guān)注的問(wèn)題，如果不及時(shí)處理，可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備造成損害，也會(huì)對(duì)色譜柱造成影響，并影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文將從多個(gè)方面探討流動(dòng)相跑空對(duì)色譜柱的影響和具體的處理步驟和建議。
氣泡進(jìn)入色譜柱：當(dāng)流動(dòng)相跑空時(shí)，泵會(huì)吸入空氣，這些氣泡可能會(huì)進(jìn)入色譜柱。雖然HPLC的泵通常設(shè)計(jì)成不適合長(zhǎng)時(shí)間輸送氣體，但在泵完全停止之前，一些氣泡可能會(huì)進(jìn)入柱子。氣泡的存在會(huì)干擾流動(dòng)相的流動(dòng)，導(dǎo)致流速不穩(wěn)定，進(jìn)而影響色譜分析的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。 溶劑突然減少或中斷：流動(dòng)相跑空意味著色譜柱內(nèi)的溶劑突然減少或中斷，這會(huì)導(dǎo)致樣品在柱內(nèi)的傳質(zhì)過(guò)程受到影響。具體來(lái)說(shuō)，樣品可能會(huì)在柱內(nèi)滯留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，造成峰形展寬和分辨率降低。此外，樣品與固定相的相互作用也會(huì)減弱，導(dǎo)致保留時(shí)間縮短和靈敏度下降。 柱子內(nèi)部可能干涸：在極端情況下，如果流動(dòng)相長(zhǎng)時(shí)間跑空，色譜柱內(nèi)部可能會(huì)干涸。這會(huì)導(dǎo)致柱效顯著降低，甚至可能損壞色譜柱。
泵和密封墊的損壞：流動(dòng)相跑空不僅影響色譜柱，還可能對(duì)泵和密封墊造成損壞。因?yàn)榱鲃?dòng)相還充當(dāng)了活塞和密封墊之間的潤(rùn)滑劑，沒(méi)有了流動(dòng)相的潤(rùn)滑作用，密封墊很容易磨損。長(zhǎng)時(shí)間在缺少流動(dòng)相的情況下運(yùn)行泵，還可能導(dǎo)致泵內(nèi)部的密封圈損壞，進(jìn)而影響泵的性能和壽命。 系統(tǒng)壓力異常：流動(dòng)相跑空后，系統(tǒng)內(nèi)的壓力可能會(huì)發(fā)生異常變化。這可能會(huì)導(dǎo)致單向閥、泵、柱子和檢測(cè)器等部件堵塞或損壞。因此，在重新啟動(dòng)系統(tǒng)之前，必須仔細(xì)檢查并排除這些潛在問(wèn)題。
停泵：發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相跑空后，首先要立即停止泵的運(yùn)行，以防止進(jìn)一步的損壞。 斷開(kāi)管路：將流動(dòng)相到脫氣機(jī)等設(shè)備的管路斷開(kāi)，防止空氣繼續(xù)進(jìn)入系統(tǒng)。 2.排氣和清洗 排氣：使用注射器或其他工具，將泵及管路中的空氣排出。可以打開(kāi)沖洗閥，以較大的流速（如3-5ml/min）進(jìn)行排氣，確保系統(tǒng)內(nèi)的氣泡被完全清除。 清洗泵和管路：換上足量的新流動(dòng)相，通過(guò)泵進(jìn)行循環(huán)清洗，以去除可能殘留的雜質(zhì)和氣泡。 3.檢查并更換密封圈 檢查密封圈：長(zhǎng)時(shí)間的干磨可能導(dǎo)致泵內(nèi)部的密封圈磨損。因此，需要檢查密封圈的狀況，如果發(fā)現(xiàn)磨損嚴(yán)重，應(yīng)及時(shí)更換。 進(jìn)行壓力和泄露測(cè)試：為了確認(rèn)密封圈的性能，可以進(jìn)行壓力和泄露測(cè)試。這有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決問(wèn)題，避免進(jìn)一步的損壞。 4.沖洗色譜柱 正相色譜柱：使用正己烷/異丙醇=90/10 以較低的流速（如0.5ml/min）沖洗色譜柱，再更換為目標(biāo)流動(dòng)相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn)且確認(rèn)柱子內(nèi)無(wú)氣泡為止。 反相色譜柱：使用純甲醇或純乙腈以較低的流速（如0.5ml/min）進(jìn)行沖洗，直至基線穩(wěn)定且確認(rèn)柱子內(nèi)無(wú)氣泡為止。這一步驟有助于恢復(fù)色譜柱的性能并去除可能殘留的空氣。 逐步增加流速：在確認(rèn)色譜柱無(wú)問(wèn)題后，可以逐步增加流速至正常分析所需的流速，以確保色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。 設(shè)置最低壓力：在儀器軟件中設(shè)置泵運(yùn)行的最低壓力值。當(dāng)流動(dòng)相不足導(dǎo)致壓力下降時(shí)，泵將自動(dòng)停止工作，以保護(hù)儀器不受損壞。 監(jiān)控流動(dòng)相體積：設(shè)置溶劑瓶里流動(dòng)相的實(shí)際體積以及最小允許運(yùn)行的體積。軟件可以根據(jù)流速和時(shí)間自動(dòng)計(jì)算溶劑瓶?jī)?nèi)的剩余流動(dòng)相量，并在到達(dá)最小允許運(yùn)行的體積時(shí)自動(dòng)停止運(yùn)行。 在完成上述步驟并確認(rèn)儀器恢復(fù)正常后，可以進(jìn)行重新進(jìn)樣實(shí)驗(yàn)。通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的前后變化，評(píng)估流動(dòng)相跑空對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響程度。 7.預(yù)防措施 定期檢查和維護(hù)：定期對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行檢查和維護(hù)，確保各部件的正常運(yùn)行和性能穩(wěn)定。 遵守操作規(guī)程：嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，避免操作失誤導(dǎo)致的流動(dòng)相跑空等問(wèn)題的發(fā)生。1.立即停泵并斷開(kāi)管路
通過(guò)以上步驟和措施，可以有效地處理流動(dòng)相跑空的問(wèn)題，并恢復(fù)儀器的正常運(yùn)行。同時(shí)，采取必要的預(yù)防措施可以減少類似問(wèn)題的發(fā)生頻率，提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。
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