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色譜保留時(shí)間飄忽不定,如何破案?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2023-07-25
液相色譜保留時(shí)間總是飄忽不定,令人難以琢磨。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),色譜保留時(shí)間不重現(xiàn)分為兩種情況:一是保留時(shí)間單方向的漂移,即保留時(shí)間提前或延后;二是保留時(shí)間無規(guī)律的波動(dòng),即保留時(shí)間忽前忽后。

液相色譜保留時(shí)間總是飄忽不定,令人難以琢磨。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),色譜保留時(shí)間不重現(xiàn)分為兩種情況:一是保留時(shí)間單方向的漂移,即保留時(shí)間提前或延后;二是保留時(shí)間無規(guī)律的波動(dòng),即保留時(shí)間忽前忽后。

如何區(qū)分保留時(shí)間、死時(shí)間、調(diào)整保留時(shí)間?

介紹色譜保留時(shí)間漂移前,我們先來了解與區(qū)分保留時(shí)間、死時(shí)間、調(diào)整保留時(shí)間的概念:

  • 保留時(shí)間(tR):從進(jìn)樣開始到某個(gè)組分的色譜頂點(diǎn)的時(shí)間間隔稱為該組分的保留時(shí)間。即從進(jìn)樣到柱后某組分出現(xiàn)濃度極大時(shí)的時(shí)間間隔。

  • 死時(shí)間(t0):分配系數(shù)為0的組分的保留時(shí)間稱為死時(shí)間。通常將空氣或者甲烷視為此種組分,用來測定死時(shí)間。

  • 調(diào)整保留時(shí)間(tR'):某組分由于溶解(或者吸附)于固定相,比不溶解(或者不吸附)的組分在柱中多停留的時(shí)間稱為調(diào)整保留時(shí)間。

調(diào)整保留時(shí)間=保留時(shí)間-死時(shí)間

在實(shí)驗(yàn)室條件下(溫度、固定相等)一定時(shí),調(diào)整保留時(shí)間僅決定于組分的性質(zhì),因此調(diào)整保留時(shí)間是定性的基本參數(shù)。

液相色譜保留時(shí)間飄忽不定如何破案?

相色譜中保留時(shí)間為何忽前忽后呢?下面我們來說說主要的影響因素及“破案”方法。


1

色譜柱平衡不夠

若發(fā)生保留時(shí)間漂移,需要考慮流動(dòng)相是否已使色譜柱達(dá)到充分的平衡。一般情況下,流動(dòng)相平衡色譜柱需要10-20個(gè)柱體積;但如果流動(dòng)相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑,或者固定相為正相硅膠等,則需要更長的時(shí)間來平衡色譜柱。


2

色譜柱污染或受損

這時(shí)也可能會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的漂移,需要同時(shí)觀察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況,推測色譜柱是否被污染??梢愿鶕?jù)具體的測試條件來選擇適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行色譜柱的沖洗,或更換新的色譜柱。為了延長色譜柱的使用壽命,增加保護(hù)柱是非常有效的方法。


3

柱溫改變

確認(rèn)柱溫的準(zhǔn)確性,柱溫的變化也會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的變化。


4

流動(dòng)相改變

流動(dòng)相中某種試劑的揮發(fā),流動(dòng)相中不同試劑的比例配制有誤,也會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的變化,需要確認(rèn)流動(dòng)相是否新鮮與正確。


5

流速改變

觀察柱前壓力,如果壓力不穩(wěn)定或者偏離正常值,可能是泵流速不準(zhǔn)確或者有氣泡產(chǎn)生,出現(xiàn)保留時(shí)間的不穩(wěn)定,需要保證儀器流速的準(zhǔn)確性與穩(wěn)定性。


6

系統(tǒng)存在泄露或堵塞

觀察系統(tǒng)壓力,如果幾次進(jìn)樣的壓力曲線不能重合或差別比較大,可能是系統(tǒng)存在泄露或堵塞,出現(xiàn)保留時(shí)間的不穩(wěn)定,需要依次排查系統(tǒng)中有無漏液或堵塞異常。

小結(jié)

保持保留時(shí)間的重復(fù)性是重中之重!同時(shí),也要盡可能避免保留時(shí)間的漂移!關(guān)注保留時(shí)間的穩(wěn)定性也能反映流動(dòng)相、檢測器等的正常情況!


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